U-ProteinExpress蛋白純化原則

蛋白純化要利用不同蛋白間內(nèi)在的相似性與差異，利用各種蛋白間的相似性來除去非蛋白物質(zhì)的污染，而利用各蛋白質(zhì)的差異將目的蛋白從其他蛋白中純化出來。每種蛋白間的大小、形狀、電荷、疏水性、溶解度和生物學活性都會有差異，利用這些差異可將蛋白從混合物如大腸桿菌裂解物中提取出來得到重組蛋白。

U-ProteinExpress重組抗體使制備人源化抗體和人源抗體成為可能，而這是其他常規(guī)的多克隆或單克隆抗體制備方法所不可能做到的。主要包括四個方面的技術：抗體庫技術，包括組合抗體庫、噬菌體抗體庫、細菌和酵母展示的抗體庫、核糖體展示的抗體庫及其抗體庫的篩選技術；重組抗體基因的改造和表達，包括抗體親和力成熟、抗體人源化改造和穩(wěn)定性改造，以及抗體基因在原核、酵母、昆蟲、哺乳動物細胞、植物及轉(zhuǎn)基因動物中的表達；重組抗體效應功能的提高，涉及抗體與同位素、藥物、毒素結合的"導向藥物"、雙特異性抗體、抗體一酶融合蛋白、免疫細胞因子及細胞內(nèi)抗體；抗體特異性分析和鑒定，主要介紹抗體的分離和純化、抗體標記技術、抗體親和力測定、抗體的抗原表位分析、抗體基因測序和結構模建，以及常用的抗體鑒定技術，如ELISA、免疫組化、FACS分析、免疫沉淀和Westernblot等。